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    標(biāo)準(zhǔn)化的微生物采集方法

    發(fā)布時(shí)間: 2010/6/2  點(diǎn)擊次數(shù): 1700次
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    詳細(xì)介紹:

    (一)基本原則
    1、發(fā)現(xiàn)感染應(yīng)及時(shí)采集微生物標(biāo)本作病原學(xué)檢查,二、三級(jí)醫(yī)院微生物標(biāo)本送檢率不應(yīng)低于70%。
    2、盡量在抗菌藥物使用之前采集標(biāo)本。
    3、標(biāo)本采集時(shí)應(yīng)嚴(yán)格無菌操作,減少或避免機(jī)體正常菌群及其它雜菌污染。
    4、標(biāo)本采集后應(yīng)立即送至細(xì)菌室。床旁接種可提高病原菌檢出率。
    5、以棉拭子采集的標(biāo)本如咽拭子、肛拭或傷口拭子,宜插入運(yùn)送培養(yǎng)基送檢。
    6、送檢標(biāo)本應(yīng)注明來源和檢驗(yàn)?zāi)康?,使?xì)菌室能正確選用相應(yīng)的培養(yǎng)基和適宜的培養(yǎng)環(huán)境。
    (二)血液與骨髓的送檢方法
    1、通常采血部位為肘靜脈。疑似細(xì)菌性心內(nèi)膜炎時(shí),以肘動(dòng)脈或股動(dòng)脈采血為宜,切忌在靜滴抗菌藥物的靜脈處采取血標(biāo)本。
    2、采血部位的局部皮膚應(yīng)嚴(yán)格消毒。將采集的血液注入血培養(yǎng)瓶前,應(yīng)更換針頭或過火消毒針頭。
    3、每次采血量成人5~10ml,嬰幼兒1~2ml,培養(yǎng)基與血液之比以10:1為宜,以稀釋血液中的抗生素。
    4、懷疑菌血癥因盡早采血,體溫上升階段采血可提高陽性率,但要防止因等待而延誤時(shí)機(jī)。對(duì)已用抗菌藥物而不能停藥者,可在下次用藥前采血。
    5、對(duì)疑為細(xì)菌性骨髓炎或傷寒病人,在病灶或髂前(后)上棘處嚴(yán)格消毒后抽取骨髓1ml 作細(xì)菌培養(yǎng)。
    (三)尿液的送檢方法
    1、中段尿:女性采樣前應(yīng)先用肥皂水或0.1%高錳酸鉀溶液沖洗外陰部及尿道口;男性須翻轉(zhuǎn)包皮沖洗,用0.1%新潔爾滅消毒尿道口,滅菌紗布擦干后,收集標(biāo)本。
    2、導(dǎo)尿管導(dǎo)尿采樣可減少污染。對(duì)留置導(dǎo)尿者,可用碘酒消毒尿道口處的導(dǎo)尿管壁,用聯(lián)空針筒的細(xì)針斜穿管壁抽吸尿液;或拔去閉式引流的集尿袋,棄取導(dǎo)尿管前段尿液,留無污染的膀胱內(nèi)尿液數(shù)毫升送檢。不可從集尿袋的下端管口留取標(biāo)本。
    3、送檢標(biāo)本以晨起*次尿?yàn)橐恕?br />4、室溫下尿標(biāo)本擔(dān)擱稍久可導(dǎo)致尿內(nèi)細(xì)菌濃度明顯增加而影響病原菌與污染菌的區(qū)分。不能立即送檢者,可暫存4℃冰箱。
    (四)痰標(biāo)本的送檢方法
    1、咳痰:清水反復(fù)漱口后用力咳痰,從呼吸道深部咳出新鮮痰液于無菌容器送檢。痰量極少者可用45℃10%氯化鈉溶液霧化吸入導(dǎo)痰。
    2、對(duì)咳嗽乏力或昏迷病人,可用吸痰管經(jīng)鼻腔或口抵達(dá)氣管腔內(nèi)吸引痰液。用纖維支氣管鏡可直接在病灶部位采集高濃度的感染病原菌,但不能*避免咽喉部正常菌群感染。
    3、雙側(cè)肺部感染伴人工氣道如氣管切開或氣管插管患者,可用吸痰管經(jīng)人工氣道估插至葉支氣管水平吸引痰液。
    4、痰標(biāo)本不能及時(shí)送檢者,可暫存4℃冰箱。室溫下?lián)鷶R數(shù)小時(shí)定植于口咽部的非致病菌呈過度生長而肺炎鏈球菌、葡萄球菌和流感嗜血桿菌檢出率明顯降低
    (五)手術(shù)創(chuàng)口、燒傷創(chuàng)面于膿液
    1、無菌生理鹽水擦洗病灶表面后,用棉拭子采取病灶深部的膿液和分秘物,置運(yùn)送培養(yǎng)基內(nèi)送檢。
    2、對(duì)未潰瘍的膿腫宜用碘酒、酒精消毒皮膚后,以無菌注射器抽取膿液送檢;也可于切開膿腫時(shí)用無菌棉拭子采樣。
    3、采樣前病灶局部應(yīng)避免用抗菌藥物或消毒劑。
    (六)糞便的送檢方法
    1、排便后,挑取有膿血、黏液部分的糞便2~3g(液狀糞便則取絮狀物),盛于蠟紙袋內(nèi)送檢。
    2、對(duì)不易獲取糞便者或嬰幼兒,可用肛拭采集。將拭子前端用無菌甘油水濕潤。然后插入肛門約4~5cm(幼兒約2~3cm)處,輕輕旋轉(zhuǎn)擦取直腸表面黏液后退出,置運(yùn)送普及內(nèi)送檢。
    (七)咽拭、口腔拭子的送檢
    1、病人清水漱口后,由檢查者將其舌外拉時(shí)懸幽垂盡可能向外牽引,棉拭子越過舌根到咽后壁或懸幽垂的后側(cè),反復(fù)擦拭數(shù)次,插入運(yùn)送培養(yǎng)基。棉拭子應(yīng)避免觸及舌、口腔黏膜和唾液。
    對(duì)化膿性扁桃體炎或口腔念珠菌病,用棉拭
    臨床標(biāo)本的處理
    1、血標(biāo)本
    1. 1常見細(xì)菌
    革蘭陽性菌:肺炎鏈球菌、金葡萄球菌、表皮葡萄球菌、溶血性鏈球菌、糞腸球菌、類白喉棒狀桿菌、產(chǎn)單核李斯特菌等。
    革蘭陰性菌:腦膜炎奈瑟菌、卡他布蘭漢菌、傷寒沙門菌、流感嗜血桿菌、大腸艾希菌、變形桿菌、產(chǎn)汽腸桿菌、銅綠假單孢菌、肺炎克雷伯菌等。
    1.2臨床意義
    血液培養(yǎng)應(yīng)用于傷寒、副傷寒、化膿性細(xì)菌和其他革蘭陰性桿菌引起的敗血癥的診斷。
    目前引起敗血癥的細(xì)菌多為金葡萄球菌和大腸艾希菌。
    疥、癰和膿腫繼發(fā)的敗血癥主要是金葡萄球菌和溶血性鏈球菌引起。
    尿道、膽、胃腸黏膜損傷引起的敗血癥以大腸艾希菌多見,其次為變形桿菌、產(chǎn)汽腸桿菌、葡萄球菌。
    急性細(xì)菌性心內(nèi)膜炎以金葡萄球菌、溶血性鏈球菌、腦膜炎奈瑟菌常見;亞急性心內(nèi)膜炎以草綠色鏈球菌多見,偶見腸球菌;化膿性心包炎以金葡萄球菌、溶血性鏈球菌、肺炎鏈球菌多見。
    血液病、肝硬化引起的敗血癥金葡萄球菌和銅綠假單孢菌為主。
    彌漫性血管內(nèi)凝血以革蘭陰性桿菌為主。
    燒傷后敗血癥以銅綠假單孢菌為主。
    3、 痰標(biāo)本
    常見細(xì)菌: 肺炎鏈球菌、化膿性鏈球菌、金葡萄球菌、結(jié)核分枝桿菌;腦膜炎奈瑟菌、卡他布蘭漢菌、肺炎克雷伯菌、大腸艾希菌、銅綠假單孢菌、沙雷菌、流感嗜血桿菌。
    痰標(biāo)本:須接種2個(gè)血平板,一個(gè)放普通孵箱,另一個(gè)放CO2孵箱.痰標(biāo)本接種于血平板、麥康凱平板、巧克力平板。巧克力平板是用來篩選流感嗜血桿菌。肺炎鏈球菌和流感嗜血桿菌的檢出率是衡量一個(gè)細(xì)菌室水平的重要依據(jù),因此對(duì)于包括以上兩種菌在內(nèi)的苛養(yǎng)菌的鑒定應(yīng)引起重視。痰標(biāo)本接種時(shí),*區(qū)劃完線后,接種環(huán)必須過火消毒,否則將達(dá)不到分區(qū)的效果。
    痰標(biāo)本建議接種2個(gè)血平板、一個(gè)巧克力平板、一個(gè)麥康凱平板。 痰標(biāo)本于咽標(biāo)本的處理基本相同。
    4、 尿標(biāo)本
    常見細(xì)菌:大腸艾希菌、葡萄球菌、變形桿菌。
    注意事項(xiàng):尿標(biāo)本不能離心,離心將使污染菌也集中于沉淀部分,導(dǎo)致錯(cuò)誤結(jié)果。一般而言,菌落大于105/ml代表真正感染,103/ml以下表示污染,104~105為懷疑污染,如病人的排尿速度太快或接受藥物治療或尿的pH小于5.0,比重小于1.003時(shí),細(xì)菌的數(shù)目可能降低。因此病人若已服用抗生素,104菌落即需進(jìn)行鑒定和抗生素藥敏試驗(yàn)。 

     

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